Aliarcobacter butzleri is an emerging foodborne and zoonotic pathogen, yet many of its encoded proteins remain functionally uncharacterized. This lack of annotation limits understanding of its molecular mechanisms and hampers the identification of novel therapeutic targets. In this study, we systematically performed functional annotation of essential hypothetical proteins from the BNI-3166 strain using an integrative-in-silico approach to uncover potential drug and vaccine candidates. 2,367 protein-coding sequences were retrieved from the RefSeq database and were identified 356 as hypothetical proteins. Using BLASTp, we screened these HPs against the Database of Essential Genes and the human proteome to identify essential non-homologous proteins, resulting in 20 ENH candidates. Functional annotation was performed using several domain-based databases, including Pfam, InterPro, SMART, and SUPERFAMILY. Subsequently, physicochemical properties were analyzed and predicted subcellular localization using PSORTb and CELLO. To assess druggability, the ChEMBL database was used. Virulence factors using VFDB, VICMpred, and VirulentPred 2.0 were also predicted. Gene Ontology annotations were generated via ARGOT2.5. Furthermore, we explored protein-protein interactions using STRING and predicted tertiary structures with AlphaFold3. Moreover, Ligand binding pockets were predicted using PrankWeb, and antigenicity of vaccine candidates was assessed using VaxiJen v2.0. We identified 20 essential non-homologous hypothetical proteins, of which 10 were confidently annotated based on conserved domain analysis. These proteins were classified as enzymes, binding proteins, transporters, regulatory proteins, and potential virulence factors. Among them, eight exhibited characteristics of promising drug targets, while two showed potential as vaccine candidates based on subcellular localization. Druggability analysis revealed that nine proteins had no similarity to known drug targets, suggesting novel therapeutic potential. Predicted 3D structures generated using AlphaFold3 yielded pTM scores ranging from 0.44 to 0.92, indicating acceptable to high modeling confidence. Ligand binding site analysis confirmed druggability in six candidates, and antigenicity screening identified one protein as a potential vaccine target. This study provides a computational framework for identifying functionally important proteins in A. butzleri BNI-3166 and highlights novel therapeutic candidates for experimental validation, offering new directions in drug and vaccine development against this underexplored pathogen.
Key words: Aliarcobacter butzleri, Drug Target Identification, Functional Annotation, Hypothetical Proteins, In Silico Analysis
Received: 08.07.2025; Accepted: 01.09.2025; Early view: 24.09.2025 Published: 10.01.2026
DOI: 10.62063/ecb-66
Citation: Paul, S., Barua, S., & Barua, J.D. (2026). In-silico functional annotation and structural characterization of hypothetical proteins from Aliarcobacter butzleri BNI-3166: Insights into novel virulence and drug targets. The European chemistry and biotechnology journal, 5, 22-39. https://doi.org/10.62063/ecb-66
The copyrights of the studies published in The European Chemistry and Biotechnology Journal (EUCHEMBIOJ) belong to their authors
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: Le réalisateur Francis Lawrence a exprimé son regret d'avoir dû brider le premier film pour obtenir une classification PG-13 (interdit aux moins de 13 ans non accompagnés), alors que le contenu flirtait constamment avec l'horreur pure. Cette fois, la suite embrassera pleinement la noirceur du matériel d'origine des comics Hellblazer . Attendez-vous à un film d'horreur fantastique viscéral, violent et sans concession.
Une exploration plus profonde des Enfers et des pactes spirituels.
: Akiva Goldsman a finalisé une version du script qui a été présentée aux bureaux de DC Studios. Fenêtre de sortie : Les experts de l'industrie tablent sur une sortie fin ou courant , selon le calendrier des autres productions DC comme The Batman Part II
Si le scénario n'est pas encore figé, la composition principale du casting ne fait guère de doute :
Si vous voulez, je peux vous tenir au courant dès qu'une bande-annonce ou une date de sortie précise est annoncée.
Constantine 2 Film Complet Français : Tout ce qu'il faut savoir sur la suite tant attendue
However, I must clarify a key fact before proceeding: The sequel to the 2005 film Constantine (starring Keanu Reeves) has been announced as in development, but production has faced delays, and no release date has been set.
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La première occasion de découvrir le film complet en version française (VF) ou en version originale sous-titrée (VOSTFR) se fera exclusivement dans les salles de cinéma. Les grands réseaux comme Pathé, UGC ou CGR assureront une large distribution. 2. L'achat et la location digitale (VOD)
Aucune date de sortie officielle n'a été verrouillée pour le moment. L'avancement actuel du projet laisse présager un tournage imminent, avec une sortie en salles idéalement calée pour . Le Casting : Qui revient pour cette suite ?
Pour l’instant, Warner Bros. France n’a pas communiqué sur le casting vocal. Cependant, les fans francophones espèrent le retour de (voix française attitrée de Keanu Reeves) pour doubler John Constantine. Du côté de Lucifer, Philippe Catoire (sa voix en VF dans le premier film) serait également pressenti.
: Le script est finalisé ou en cours de révision finale pour s'assurer qu'il conserve l'esprit sombre et "R-rated" (interdit aux mineurs) de l'original. Prévisions de sortie
As of the latest updates, Constantine 2 sits in a precarious position. While James Gunn has confirmed that the project is in development, its scope and scale seem to have shifted. There are rumors that the script is being reworked to fit into the new DCU, or conversely, that it is being positioned as a "DC Elseworlds" project—a label for films that exist outside the main continuity, similar to Joker or The Batman .
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